在對生物細胞的測序?qū)嶒炛?，如何獲得高質(zhì)量的單細胞懸浮液是成功的關(guān)鍵，但復(fù)雜多樣的組織類型卻會給懸浮液的制備帶來挑戰(zhàn)。那這該如何從細胞組織樣本中獲得高質(zhì)量的單細胞懸液呢？
單細胞懸液制備儀測序技術(shù)可以在生物細胞層面進行高分辨率的實驗分析，進而可揭示單細胞的狀態(tài)和功能，避免了由傳統(tǒng)基因組技術(shù)平均信號產(chǎn)生的結(jié)果誤差；被廣泛應(yīng)用于腫瘤、發(fā)育、免疫、神經(jīng)科學、干細胞分化、大規(guī)模細胞圖譜構(gòu)建等行業(yè)研究領(lǐng)域。
為了確保后續(xù)的單細胞實驗?zāi)軌蝽樌M行，因此需要嚴格的質(zhì)量去控制細胞懸液的制備；為了確保細胞樣品的活性，建議使用新鮮的細胞組織去制備細胞懸液。若是不能在取樣后直接進行測試，可將組織樣本保存在4℃環(huán)境下的組織保存液中，在48小時內(nèi)對其進行懸液消化。
在解離前可將組織剪切成碎塊，可增加酶與組織的接觸面積；在切割組織時，可以加入少量百分之10的細胞培養(yǎng)基，可避免組織細胞脫水。酶消化法主要是利用酶來去除細胞間質(zhì)，可使細胞脫落分散；由于不同組織的細胞間質(zhì)不同，所以需要選擇特定的酶和特定的消化時間。
在獲得單細胞懸浮液后，可根據(jù)質(zhì)量控制標準對細胞的活性、結(jié)團率、濃度、直徑分布等參數(shù)進行質(zhì)量檢驗；如果這些參數(shù)的檢驗結(jié)果沒有達到預(yù)期，那對懸浮液的質(zhì)量應(yīng)根據(jù)具體情況進行優(yōu)化。
若細胞活性較低，可通過去除死細胞來提高懸浮液的細胞活性；對于細胞的結(jié)團率高是因為組織沒有完全消化或細胞釋放DNA，因此需要根據(jù)不同情況去調(diào)整消化條件、DNA優(yōu)化酶處理等措施。
綜上便是對有關(guān)生物細胞制備高質(zhì)量的單細胞懸浮液的操作應(yīng)用簡述，具體情況還需要根據(jù)實際實驗狀況進行分析。
滬公網(wǎng)安備31011702889603號 網(wǎng)站地圖