實驗目的:此次實驗選用小鼠胰腺作為樣品組織,以便在制備小鼠胰腺樣品的單細胞懸液后進行單細胞測序分析
實驗設(shè)備:單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK
小鼠胰腺樣品前處理懸液制備的實驗操作步驟:
1.提前冰浴解凍消化酶和終止液;
2.打開熱板加熱和模塊加熱,將設(shè)備加熱到37℃;
3.小鼠處死后取小鼠胰腺;
4.小鼠胰腺經(jīng)過DPBS清洗后,用紙擦干,剪成黃豆粒大??;
5.將處理后的小鼠胰腺放入消化管中,加入消化酶,上機靜置3min后使用程序2進行消化25分鐘;
6.程序結(jié)束后取出,使用40μm篩網(wǎng)過濾
7.離心、裂紅、重懸;
8.使用細胞計數(shù)儀檢測細胞活率,活率為81%。
實驗操作注意事項:
1.清洗使用沒有Ca2+和Mg2+離子的DPBS
2.提前將儀器加熱,酶和終止液提前解凍
3.后續(xù)做單細胞測序的單細胞懸液過濾需要使用40μm篩網(wǎng)
實驗操作圖:
樣品前處理懸液制備實驗效果圖:
實驗結(jié)果信息:
單細胞懸液制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代單細胞細胞懸液制備設(shè)備,主要應用于流式細胞術(shù)/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗,具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高等性能特點。