實驗目的:此次實驗主要是為了幫助我們解開視網膜疾病的神秘密碼,為找到治療這些疾病的方法打下堅實基礎。
實驗設備:單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK
實驗準備:單細胞懸液制備儀、消化酶和終止液、實驗小鼠、顯微鏡、培養(yǎng)皿、PBS緩沖液、解刨工具等
樣本取材:麻醉后、用鑷子撐開小鼠眼瞼,取出眼球,在顯微鏡下小心的從眼球壁上分離出視網膜,將分離出的視網膜放到預冷PBS緩沖液中
小鼠視網膜單細胞懸液制備的實驗操作步驟:
1.在實驗開始前,需要先使用冷水將其消化酶和終止液進行解凍
2.打開儀器、點擊管架加熱和模塊加熱,將設備加熱到37℃
3.將預冷PBS中的視網膜撈出,放到加滿消化酶的消化管中,上機預熱3min后使用程序2進行消化
4.待儀器運行程序結束后即可取出處理后的樣品效果,再使用70μm篩網對其進行過濾
5.把過濾后的樣品加入終止液,進行離心,重懸等實驗操作
6.在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)
小鼠視網膜單細胞制備的樣品實驗結果:
在顯微鏡下觀察,可以看到視網膜單細胞形態(tài)良好、活細胞數(shù)量較多,后續(xù)可進行流式分析,單細胞測序等,可進一步實驗探究視網膜中一個個獨立細胞的神奇奧秘。
單細胞懸液制備儀(控溫型)是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代制備單細胞細胞懸液的設備,應用于流式細胞術/單細胞測序/原代細胞培/類器官研究等實驗,具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高的特點。采用國際DIN方法設計,低噪音,使用方便,性能穩(wěn)定,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。