實(shí)驗(yàn)樣品:小鼠皮膚組織;由于小鼠皮膚組織中包含多種免疫細(xì)胞,多數(shù)據(jù)表明駐留在皮膚中的免疫細(xì)胞具有免疫監(jiān)視的功能,因此此次實(shí)驗(yàn)展開對小鼠皮膚組織的實(shí)驗(yàn)研究分析。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>本次實(shí)驗(yàn)是小鼠背部和尾巴上的皮膚,利用單細(xì)胞懸液制備儀消化后得到單細(xì)胞混懸液,用于后期做流式細(xì)胞分析
實(shí)驗(yàn)前處理設(shè)備:單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK
小鼠皮膚組織前處理的實(shí)驗(yàn)研磨操作過程:
1.準(zhǔn)備單細(xì)胞懸液制備儀JX-CKSM-4KW一臺(tái),配套試劑及耗材12份。
2.用冷水解凍消化酶和終止液?! ?/p>
3.試劑解凍后,準(zhǔn)備好試驗(yàn)樣品。選取小鼠背部皮膚和尾部皮膚各100mg,用手術(shù)剪剪成糊狀,加入裝滿消化酶的樣品管內(nèi)?!?/p>
4.打開儀器電源,將樣品管放入單細(xì)胞懸液制備儀的管架上,選中管架加熱,點(diǎn)擊啟動(dòng),管架加熱3-5分鐘?! ?/p>
5. 管架加熱結(jié)束后,將樣品管放到模塊上,選擇程序4,選中模塊加熱,點(diǎn)擊啟動(dòng)。
6.儀器運(yùn)行結(jié)束后,自動(dòng)停止,用40um濾網(wǎng)過濾,加入終止液終止消化(消化液:終止液1:2)
7.放到冷凍離心機(jī)上離心,離心后棄掉上清,加一定量終止液進(jìn)行重懸,重懸后的混懸液就是我們需要的單細(xì)胞混懸液。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1、為了保證實(shí)驗(yàn)效果,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程,樣品操作都在冰上進(jìn)行。
2、配套試劑盒需要-20℃保存,使用前用冷水解凍,解凍后放在冰上。使用結(jié)束后繼續(xù)放到-20℃保存。
小鼠皮膚組織前處理的實(shí)驗(yàn)研磨結(jié)果:
單細(xì)胞制備儀對小鼠皮膚組織樣品的前處理實(shí)驗(yàn)效果對比圖由上圖可看出,樣品的前處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果滿足了樣品實(shí)驗(yàn)需求,便于后續(xù)的樣品實(shí)驗(yàn)研究分析。流式細(xì)胞分析都需要制備單細(xì)胞懸液。實(shí)體組織樣品和腫瘤在分析前需要處理成單細(xì)胞懸液。無論在何種情況之下,好的細(xì)胞得率和細(xì)胞活率對后續(xù)實(shí)驗(yàn)都是至關(guān)重要的。
單細(xì)胞懸液制備儀是一款具備集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細(xì)胞懸液制備設(shè)備,可用于流式細(xì)胞術(shù)、原代細(xì)胞培養(yǎng)、單細(xì)胞測序等實(shí)驗(yàn),具有起始量小,時(shí)間短,細(xì)胞得率高等特點(diǎn)。